产品货号:
JN5059
中文名称:
2×RoomTop Taq MasterMix(含染料)
英文名称:
2×RoomTop Taq PCR Master Mix(Quick Load)
产品规格:
5mL|25mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本制品是以2×Taq MasterMix为基础,与新型稳定剂整合后研发成功的预混试剂,具有极佳的保存稳定性,室温存放2个月,4℃存放6个月后,依然能保持极佳的扩增性能。2×RoomTop Taq MasterMix(含染料)保持了2×Taq MasterMix试剂的特点,扩增长度可达8kb,能对4kb及其以下长度的片段进行高效地扩增。使用时只需加入模板和引物并稀释到一倍浓度即可进行PCR反应,大大地简化了操作过程,减少了PCR操作过程中的污染。2×RoomTop Taq MasterMix(含染料)在PCR反应完成后可直接电泳,节省时间。经测试,高纯度染料的加入不影响PCR反应。
- 常规PCR扩增;
- 小片段DNA克隆;
- PCR产物加A。
便利:可置于实验台上的PCR试剂。
稳定:室温存放2个月,4℃存放6个月,扩增性能不受影响。
组分 | 5mL | 25mL |
2×RoomTop Taq MasterMix(含染料) | 5×1mL | 25×1mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-20℃
经检测无外源核酸酶残留,qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。
使用建议
- 使用本试剂扩增得到的PCR产物3′端有一突出"A"碱基,可直接克隆于T载体中。
- PCR反应液请在冰上配制,然后置于PCR仪上进行。这种冷启动法可增加PCR扩增的特异性,得到良好的PCR结果。
- 使用PCR克隆目的片段时,为减少PCR过程中的随机突变,可适量增加模板量,减少PCR循环(如20至25次循环)。
- 需溶解完全后使用,防止离子浓度不均匀。
- 应根据实验目的选择合适的循环数,循环数过少,会造成扩增量不足。循环数过多,扩增量增加,但突变率会增加,并造成非特异性扩增。
- 根据引物Tm值设置合适的退火温度,退火温度过低,会造成非特性扩增。退火温度过高,可能扩增不到目的条带。
- 常用反应体系
注:Mg2+终浓度为2mM。成分 用量 2×RoomTop Taq MasterMix(含染料) 25μL 上游引物 0.2~1.0μM(终浓度) 下游引物 0.2~1.0μM(终浓度) 模板 1~50ng(质粒)
10ng~1μg(基因组)ddH2O 至50μL - 推荐PCR反应程序
- 当扩增片段<3K:
循环数 温度 时间 1 94℃ 90s 30 94℃ 20s 50~60℃ 20s 72℃ 1kb/60s 1 72℃ 5min 1 4℃ 保温 - 当扩增片段≥3K(推荐引物长度≥30bp):
循环数 温度 时间 1 94℃ 5min 30 94℃ 5s 68℃ 1kb/60s 1 72℃ 5min 1 4℃ 保温
- 当扩增片段<3K:
在50μL体系中,使用室温保存不同时间后2×RoomTop Taq MasterMix(含染料)试剂对小鼠基因组1.6kb片段进行扩增。
泳道M:DNA Ladder 2000 Plus;
泳道1:0周;泳道2:2周;
泳道3:4周;泳道4:6周;
泳道5:8周;泳道6:10周。
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